Achtergrondtechnologie
Cagrilintide is een nieuw, langwerkend geacyleerd amyline-analoog. Als niet-selectieve agonist van de amylinereceptor (AMYR) en de calcitonine G-eiwit-gekoppelde receptor (CTR) is het een cyclisch polypeptide dat bestaat uit 38 aminozuren. De sequentie bevat 38 aminozuren en een paar disulfidebindingen. Cagrilintide kan het lichaamsgewicht en de voedselinname aanzienlijk verminderen en heeft potentieel in onderzoek naar obesitas. Amylin is een ander hormoon dat verband houdt met honger en verzadiging buiten de GLP-1-signaalroute.
Cagrilintide kan de energie-inname verminderen, voedselkeuzes en -voorkeuren reguleren, een glucoseregulerend effect uitoefenen doordat het samen met insuline wordt uitgescheiden, de postprandiale afgifte van glucagon remmen en de maaglediging vertragen. Het heeft duidelijke voordelen bij de behandeling van diabetes, obesitas, metabool syndroom, hart- en vaatziekten en andere aspecten, en heeft brede vraag- en toepassingsmogelijkheden.
Chemische structuurformule van Cagrilintide
Basisinformatie
EngelsNaam：Cagrilintide
Bedrijfsnummer：GT-F064
CAS：1415456-99-3
Sfrequentie：γ-Glu-Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Glu-Phe-Leu-Arg-His-Ser-Ser-Asn-As n-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Pro-NH2 (disulfidebrug: cys4-cys9)
MoleculairFformule：C194H312N54O59S2
MoleculairGewicht：4409.01
Grondstoffen gebruikt voorCagrilintide
Synthetische route
Cagrilintide-bereidingsdiagram
(1)Voorbereiding vanCagrilintidePeptide hars
Neem 1,5 mmol van het eerste beschermde aminozuur en 1,5 mmol HOBT, los op met een geschikte hoeveelheid DMF en koel af tot 0~15°C; neem nog eens 1,5 mmol DIC, voeg het langzaam onder roeren toe aan de DMF-oplossing van het beschermde aminozuur en roer de reactie gedurende 10 minuten bij 0-15°C om een geactiveerde beschermde aminozuuroplossing te verkrijgen, die opzij wordt gezet.
Neem 0,5 mmol aminohars (substitutiegraad 0,42 mmol/g), zwel het met DMF-oplossing gedurende 60 minuten, ontscherm het met 20% Pip/DMF-oplossing gedurende 30 minuten, was en filtreer om de te reageren hars te verkrijgen.
Voeg de geactiveerde eerste beschermde aminozuuroplossing toe aan de te reageren hars, voer de koppelingsreactie uit bij 25~35℃ gedurende 120~300 minuten, filter en was om de hars te verkrijgen die 1 beschermd aminozuur bevat: Fmoc-Pro-Resin
Gebruik dezelfde methode als hierboven om achtereenvolgens toegang te krijgen tot de overeenkomstige 2e tot en met 38e beschermde aminozuren of fragmenten die hierboven zijn genoemd:Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-His(Trt)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，Fmoc-Ala-OH·H2O，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Gin(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Me,Me)pro)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Me,Me)pro)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu-OtBu，Mono-tert-butyleicosaandioaat, wat 4,98 g carmegliptinepeptidehars oplevert
(2)Bereiding van ruwe olieCagrilintide lineair peptide
Neem 4,49 g carfilzomib-peptidehars, voeg de gemengde TFA-oplossing toe, de verhouding van de gemengde oplossing is TFA:EDT/Tis/fenol/H₂O = 87,5:2,5:5:2,5:2,5, en de dosering is 8 ml per gram hars; roer de reactie gedurende 3 uur bij 20-30°C, filtreer het reactiemengsel met een zandkerntrechter, verzamel het filtraat, was de hars driemaal met een kleine hoeveelheid TFA, combineer de filtraten, voeg MTBE toe voor precipitatie, was het neerslag driemaal met MTBE en pomp het droog om een gebroken wit poeder te verkrijgen, dat bestaat uit 2,08 g ruw lineair carfilzomib-peptide.
(3)Bereiding van ruwe Cagrilintide cyclische peptide-oplossing
Neem 0,50 g ruwe lineaire oplossingCagrilintide-peptide, bereid een ruwe lineaire peptide-oplossing met een concentratie van 5,0 mg/ml, voeg 5 ml DMSO-oplossing druppelsgewijs onder roeren toe en reageer gedurende 20 uur bij 20 ~ 30 ℃ om een ruwe cyclische cagrilintide-peptide-oplossing te verkrijgen.
(4)Bereiding van verfijndCagrilintide-peptide
Neem de ruwe olieCarraglitide cyclische peptide-oplossing en filtreer deze met een gemengd microporeus filtermembraan van 0,45 μm；
Zuiver en prepareer met behulp van hoogwaardige vloeistofchromatografie, en verzamel deCarragliptinefracties；
Voor de bufferuitwisseling werd hoogwaardige vloeistofchromatografie gebruikt. De belangrijkste piek na bufferuitwisseling werd verzameld en de zuiverheid ervan werd gedetecteerd door middel van analytische vloeistofchromatografie. De belangrijkste piekoplossingen na bufferuitwisseling werden gecombineerd, geconcentreerd onder verminderde druk om een waterige azijnzuuroplossing van carbotide te verkrijgen, die werd gevriesdroogd om 152,18 mg geraffineerd carbotide te verkrijgen met een zuiverheid van 99,58%, een maximale enkele onzuiverheid van 0,09%, een totale opbrengst van 31,87% en een molecuulgewicht van 4409,0.
HPLC diagram
MS-diagram
De bovenstaande voorbeelden laten zien dat, vergeleken met het stapsgewijze koppelingssyntheseproces, het product verkregen door de werkwijze van de onderhavige uitvinding een zuiverheid heeft van meer dan 99,0%, en elke afzonderlijke onzuiverheid minder dan 0,1% is, wat de productkwaliteit en de totale opbrengst verbetert. Het proces is eenvoudig en gemakkelijk te controleren, kent een hoge mate van industrialisatie en heeft uitgebreide praktische waarde en toepassingsmogelijkheden.
Neem contact met ons op
Telefoon: +86-18986204913
Tel: +86-027-83338163
E-mail: info@cosperpharma.com
